Práctica 13 (2ºTRI): Determinación de coombs indirecto

Determinación de coombs indirecto

Con esta practica buscamos la presencia de Ac irregulares o incompletos en el suero del paciente, estos los enfrentaremos a hematíes tapados y luego a la AGH.

Materiales:

• Pipetas automáticas 
• Puntas de pipeta
• Cubo para desechos
• Tubos de ensayo de 3 ml
• Pipetas pasteur

Muestra:

• Suero problema

Reactivos:

• AGH y SF
• Hematíes tirados del grupo O+

Procedimiento:

- Preparación de los hematíes tipados O+:

              A) Realizar lavado y dilución de los hematíes tipados O+ Al 5% como ya hicimos en
                   prácticas anteriores.

              B) Usamos lo ya hecho en los anticuerpos irregulares

- Técnica

1. En un tubo ponemos 4 gotas del suero problema.
2. Añadir al tubo anterior 4 gotas de la suspensión de hematíes O+ y agitamos suavemente con los dedos, dando golpecitos.
3. Llevamos a incubar el tubo al baño durante 20 minutos.
4. Lavamos la mezcla añadiendo 1 ml de SF.
5. Repetimos el lavado una vez más.
6. Al sedimento le ponemos 4 gotas de AGH. 
7. Llevamos a centrifugar el tubo a 2500 rpm durante 1 minuto.
8. Resuspendemos el sedimento dando pequeños golpes en la mesa o con los dedos en la parte inferior del tubo.
9. Observamos. Vemos que hay ausencia de aglutinación.