Práctica 19 (2ºTRI): LEUCOGNOST-ALPA

Identificación de la actividad de la fosfatasa alcalina en leucocitos

Principio:

La fosfatasa alcalina de leucocito ría cataliza la hidrólisis de ésteres fosfóricos en medio alcalino. El 1-naftol liberado a partir del fosfato de 1-naftilo se acopla con una sal de diazonio para dar un azocolorante pardo, que precipita en la célula de acuerdo con la localización y la actividad de la fosfatasa alcalina en la célula.

Reactivo:

- LEUCOGNOST-ALPA

- Tres tipos de reactivos en el kit

Material:

• Cubos para desecho
• Cubeta para tinción
• Probeta
• Pipetas automáticas y puntas
• Pipeta graduada
• Vaso de precipitados 

Procedimiento:

1. Se realizan los preparados para el tinte.
2. Primero metemos los portas en una solución fijadora durante 2 minutos.
3. Enjuagamos con agua del grifo durante 10 segundas. Dejar secar al aire.
4. Ponemos los portas en la tinción durante 30 minutos.
5. Metemos en un vaso de precipitados con agua destilada durante 5 minutos.
6. Ponemos en contratinción durante 5 minutos.
7. Lavamos bajo grifo durante 5 minutos.
8. Dejamos secar al aire.