Práctica 23 (2ºTRI): HIERRO

Determinación cuantitativa de hierro 

Principio:

El hierro se disocia del complejo sérico hierro-transferrina en medio ácido débil. El hierro libre se reduce a ion ferroso mediante el ácido ascórbico. Los iones ferrosos en presencia de FerroZine forma un complejo coloreado. La intensidad del color es proporcional a la concentración de hierro en la muestra.

Significado:

El hierro es necesario para la producción de hemoglobina. Su déficit causa anemia ferropénica. Se encuentran niveles elevados de hierro en la hemocromatosis, cirrosis, hepatitis aguda y en concentraciones altas de transferrina. La variación día a día es común en poblaciones sanas.
El diagnostico clínico debe realizarse teniendo en cuenta todos los datos clínicos y de laboratorio.

Reactivo:

R1Tampón Acetato
R2 Reductor Ácido ascórbico
Color FerroZine
IRON CAL Patrón primario acuoso de Hierro

Material:

• Pipetas automáticas y puntas
• Pipetas pasteur
• Tubo de ensayo de 3 ml
• Tapones
• Cubo para desechos

Muestra:

- Suero o plasma heparinizado

Procedimiento:

1. Utilizamos como muestra para estas mediciones el sobrenadante que obtuvimos en la TIBC.
2. Pipeteamos en los tubos.
3. En el blanco de reactivo ponemos 1,0 ml de RT + 1 gota de R3 + 200 ul agua destilada
4. En el patrón ponemos 1,0 ml de RT + 1 gota de R3 + 200 ul de patrón
5. Blanco muestra ponemos 1,0 ml de RT + 200 ul de muestra.
6. Muestra ponemos 1,0 ml de RT + 1 gota de R3 + 200 ul de muestra.
7. Medimos las absorbancias

Cálculo de absorbancias: 0,099/0,086 x 100 = 115,12 g/dL de Hierro en la muestra.

Cá lculo de CFTH = 345’35